1、过硫酸氢钾定性消菌试验流程:
(1)中和剂鉴定试验:
以一株金黄色葡萄球菌和一株大肠杆菌为试验菌,按照相关消毒规范中消毒剂杀微生物剂试验中和剂鉴定试验的相关规定进行操作和结果判定。
(2)悬浮液定量消菌试验:
按照相关消毒规范的相关要求,分别制备金黄色葡萄球菌和大肠杆菌悬浮液,用0.03mol/lpbs缓冲液(pH=7.2)×10'~5.0×10'CFU/mL稀释到3.0。用无菌标准硬水将过硫酸盐粉末分别制备成5.0g/l和2.5g/l溶液,并放入20℃±1℃的水浴中备用。分别吸取0.5ml菌悬液和4.5ml过硫酸氢钾复合粉剂溶液,置于20℃±1℃水浴中预定时间。及时吸取上述菌悬液1.0ml,加入中和剂9.0ml,混匀。中和10min后,吸取1.0ml样液,计数培养活菌,计算消菌率。对照组用无菌标准硬水代替过硫酸盐粉剂溶液,同时进行上述步骤。上述试验重复3次。
(3)定性消菌前试验:
按照相关消毒规范要求,分别配制金黄色葡萄球菌atcc29213、大肠杆菌ATCC25922、沙门氏菌atcc14028和链球菌atcc43765混悬液,用0.03mol/lpbs缓冲液(pH=7.2)×107~1.0×10°CFU/mL稀释到1.0,用无菌标准硬水制备过硫酸氢钾复合粉,浓度分别为5、2.5、1.25和1.0g/l。分别将上述浓度溶液8.0ml移入无菌试管中,然后在每根试管中加入1.0ml菌悬液混合均匀。作用达到预定时间后,及时吸取上述菌悬液1.0ml,加入中和剂9.0ml,混匀。中和10min后,取出0.5ml,加入4.5ml营养肉汤培养基中。同时接种阳性对照,37℃培养24h。如果培养基管混浊,说明有细菌生长;如果培养基管没有混浊,继续培养到第7天。如果仍然没有混浊,则确定没有细菌生长。无菌生长管消毒剂浓度越低,消菌浓度越低。上述试验重复3次。
2、定性消菌试验结果:
在悬浮液定量消菌试验的基础上,进一步评价过硫酸盐粉对畜禽养殖临床常见致疾菌如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌和链球菌的杀灭活性。从结果可以看出,浓度为1.0g/l的过硫酸氢钾溶液可在5分钟后杀死大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,10分钟后杀死沙门氏菌和链球菌。
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